مجلة کربلاء للعلوم الصیدلانیة

الملخص

الوقت الحقيقي لتفاعلات الكوثرة الكمية (rt-qPCR) و كذلك فحص الانزيم المرتبط مناعياً (ELISA) هي تقنيات قوية و حساسة للغاية و التي تم استخدامها عالميا في القياس الكمي للتعبير الجيني. الهدف من هذا العمل يمتلك جزئين: الجزء الاول هو لقياس مستوى التعبير الجيني لعامل التخثر التاسع للانسان (hFIX) بوساطة توظيف (qPCR) لقياس كمية الحمض النووي الرايبوزي الناقل (mRNA) المنسوخ حديثاً. الجزء الثاني هو لكشف بروتين عامل التخثر التاسع المركب (rFIX) المترجم باستعمال تقنية ال(ELISA). في هذه الدراسة تم قياس مستويات (mRNA) الموجودة في خلايا كبد الثدييات ( HepG2 ) و التي تم نقل عدوى جين ال( hFIX) كمياً بوساطة (qPCR) بنجاح و ذلك باستخدام hACTB كجينات التدبير المنزلي. كما تم ملاحظة مستوى بروتين rFIX و التي تم ترجمتها باستخدام جهاز ELISA. كانت قيمة ΔCt و ΔΔCt للخلايا المصابة بالعدوى بالنقل (ـ١) و (ـ٢١) على التوالي ، في حين كان تركيز rFIX في هذه الخلايا ٥،٤٩٥ نانوغرام / مل ، والتي هي أكثر ب ٨٠٠ مرة بالمقارنة مع الخلايا السيطرة. التحقق من صحة مثل هذه الأساليب ، والتي تستخدم لتقدير كل من الجينات و البروتين المترجم، له أهمية كبيرة. وعلاوة على ذلك، دراسة وظيفة البروتين المستهدف هو أكثر أهمية نظرا للتحديات المرتبطة بهذه التقنيات.