مجلة کربلاء للعلوم الصیدلانیة

الملخص

تضمنت الدراسة عزل و تنمية الخلايا الجذعية الميزنكيمية من نقي العظم للارنب الابيض الذكر والذي يزن حوالي 3 كغم والجرذ الابيض المختبريين طبقا لقوانين هيئة العناية بالحيوان واستعماله للأغراض البحثية و التعليمية وذلك باتباع طريقة محورة لهذا الغرض. بأيجاز, بعد قتل الحيوان داخل كابينة غاز أحادي أوكسيد الكاربون تم استئصال عظمي الفخذ وعظمي القصبة وبعدها تم استخراج نقي العظم منها والذي خلط مع محلول الفوسفات الملحي ( (PBS. ثم تم فصل الخلايا الجذعية الميزنكيمية من الخليط بوساطة السنترفيوج مع فارق الكثافة وذلك بأضافة مادة الفيكول. بعد ذلك تم تحديد حيوية الخلايا المفصولة عن طريق تقنية التصبيغ بصبغة التريبان الزرقاء. بعدها تم استنبات الخلايا في عشرة اطباق زرعية نسيجية يحوي كل منها على الوسط الزرعي النسيجي المتكامل مدعما بالمصل البقري والمضادات الحيوية حيث تم الحضن بدرجة 37 مئوية في محيط رطب يحوي 5% غاز ثاني أوكسيد الكاربون. عندما أصبحت درجة اتصال المستعمرات الخلوية 80-90% كانت جاهزة لفصلها بواسطة محلول أنزيم التربسين مع EDTA واستنباتها في الوسط الزرعي الدائمي